解读新型冠状病毒核酸检测

庄颖娜邵龙飞

2020-02-21 09:13:06　来源：解放军报

　　新型冠状病毒核酸检测，对于临床早发现、早诊断、早隔离、早治疗至关重要，是有效防控新冠肺炎疫情的关键技术支撑。那么，核酸检测的原理是什么？为什么有些病人没有确诊但会被几次采样检测？我们普通人能否进行自测？针对这些问题，记者采访了军事医学研究院副研究员康晓平。

　　问：病毒核酸检测试剂盒的原理是什么？

　　答：由于核酸检测技术成熟、易于实施，核酸检测目前是病毒感染检测的最主要方法。

　　病毒的特点就是形态非常小，在普通光学显微镜下看不到，肉眼更是无法直接观察。但每种病毒都有其独特的基因序列，通过检测病人体内的病毒核酸，就可判断病人体内是否存在病毒。

　　现在的病毒核酸检测试剂盒，多数采用荧光定量PCR方法。检测原理就是以病毒独特的基因序列为检测靶标，通过PCR扩增，使我们选择的这段靶标DNA序列指数级增加，每一个扩增出来的DNA序列，都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，累积的荧光信号就越强。而没有病毒的样本中，由于没有靶基因扩增，因此就检测不到荧光信号增强。所以，核酸检测，其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。

　　问：病毒核酸检测试剂盒是怎样研发出来的？

　　答：病毒核酸检测试剂盒的一个优势就是研发过程很快，但前提是必须掌握一定量的病毒基因序列。一旦有了病毒基因序列，通过生物信息学分析，就可确定候选的核酸检测靶标，并进行引物和探针的设计。核酸检测试剂盒的组分中，检测引物和探针最为关键。灵敏特异的扩增引物，对检测结果的准确与否发挥着至关重要的作用。所以，一般在研发阶段都会设计多对引物探针，通过实验筛选出扩增效果最好的引物探针，组装在病毒核酸检测试剂盒中。

　　问：病毒核酸试剂盒在使用中应注意哪些问题？

　　答：为了应对防控新冠肺炎疫情，国家药监局开通了绿色通道，诊断试剂的审批非常快，但审批流程并没简化。每一种检测试剂，都必须完成质量检验和临床样本考核。用于考核的样本，对数量、类型都有明确要求。只有通过3家以上独立医学机构的临床样本考核，检测准确性达到临床要求，才有可能通过国家药监局的审批，获得诊断试剂生产批号。

　　核酸检测结果的准确与否，不仅与试剂盒自身的检测准确性有关，也跟检测样本采集的时机和检测样本的类型密切相关。首先，采样时机很重要，如果病人刚吃过饭、刷过牙，咽部的病毒被清洗掉了，这时候去采集，即使是病毒感染阳性病人，核酸检测也容易出现阴性结果。所以，有经验的医护人员，通常会要求病人在采集呼吸道样本前别喝水、别吃饭。

　　检测结果还跟待测样本的类型有关。同一病人同一时间采集的不同样本，检测结果差别也会很大。从疫情出现至今，我直接参与检测的临床样本有好几千例，在目前检测的新型冠状病毒感染病人样本中，通常肺部灌洗液和痰液中的病毒核酸量高于鼻、咽等呼吸道拭子,而呼吸道拭子中的病毒核酸量会远远高于血液。另外，随着病程的不断变化，病人体内的病毒量也在动态变化。所以确实会有不同时间采样检测结果不同的情况。

　　问：为什么有些病人没有确诊但会被几次采样检测？

　　答：在目前的新型冠状病毒传染病诊疗指南中，阳性病例的判定是双靶标核酸检测阳性，如果仅单靶标核酸检测阳性，病人虽不能确定为感染阳性，但也不能排除被感染，所以临床医生会根据检测结果并结合病程多次采样检测。有时，核酸阴性结果也不能排除被新型冠状病毒感染，需要排除可能产生假阴性的因素，包括：样本质量差，样本采集的时机不合适，没有正确保存、运输和处理样本，病毒变异，等等。

　　问：普通人能自己使用试剂盒进行检测吗？

　　答：目前获得生产批号的几款新型冠状病毒核酸检测试剂盒都需要专业的仪器设备，必须由专业人员在专业的实验室内进行操作，普通人在家里是无法使用的。核酸检测要取得准确结果，规范操作很关键。通常试剂盒说明书会讲解得很详细，包括适用的仪器、试剂的存储条件、试剂的配置等。专业人员按照说明书规范操作，检测结果都是可信的。

编辑：迟语洋

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